提取RNA的TRIpure LS Reagent究竟裂解什么细胞?
题目
提取RNA的TRIpure LS Reagent究竟裂解什么细胞?
我想用TRIpure LS Reagent 在全血中提取RNA ,但不知道这种试剂究竟是裂解什么细胞?(是白细胞吗?因为我要研究的东西不在白细胞内)
chlodiyi后面所说的我是赞同的,裂解特定的细胞后才能提到RNA,但不见得该种试剂可以裂解所有的细胞,我在网上查得好像是白细胞,想确定是不是,因为我想研究的TFPI(组织因子途径抑制剂)主要在内皮细胞、血小板、巨核细胞才有mRNA的表达,如果只是裂解白细胞的话,那我实验就做不下去了,我不清楚是否可以裂解血小板、巨核细胞?
答案
具我看来是所有的血细胞,不可能存在专一裂解的试剂的.那么提取的RNA就是总RNA了,你想得到哪种细胞的RNA,只有先把这种细胞分离了再说,好像流式细胞仪可以,
TRIpure LS Reagent试剂是直接从来源于人,动物、植物,酵母,细菌和病毒的液体样品中提取总RNA的试剂.在提取血液等液体样品的RNA时按一定体积比加入该试剂即可.省去了在处理样品前离心去除液体的步骤.使用该试剂可以同时提取DNA及蛋白质.提取的RNA样品可以用于后继的RT-PCR、Northern blot、dot杂交及体外转录等实验.回收的DNA片段可以用于PCR反应.血液样品的保存:为了保证提取效果,请选择新鲜的血液进行RNA的提取.在收集到血液样品后,需要加入抗凝剂.抗凝剂的选择首选EDTA,其他抗凝剂如:柠檬酸盐、肝素或者ACD也可以使用.加入抗凝剂的血液样品最好在几个小时内进行RNA提取实验.不同种类的mRNA,其半衰期也不尽相同.调控基因的mRNA的半衰期比看家基因mRNA的半衰期要短.因此,为了保证所提取的RNA能够包含更全面的信息,请尽量避免使用保存时间过长的血液进行RNA的提取.
看了资料我就知道了应该是总的RNA,包括内皮细胞、血小板、巨核细胞的mRNA,而且这个试剂不是很贵,50ml才360元,放心的买吧
举一反三
我想写一篇关于奥巴马的演讲的文章,写哪一篇好呢?为什么好
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