举例说明某一种色谱层析分离法的应用,
题目
举例说明某一种色谱层析分离法的应用,
答案
亲和色谱法
在生物体内,许多大分子具有与某些相对应的专一分子可逆结合的特性.例如抗原和抗体、酶和底物及辅酶、激素和受体、RNA和其互补的DNA等,都具有这种特性.生物分子之间这种特异的结合能力称为亲和力,根据生物分子间亲和吸附和解离的原理,建立起来的色谱法称亲和色谱法.亲和色谱中两个进行专一结合的分子互称对方为配基.如抗原和抗体,抗原可认为是抗体的配基,反之抗体也可认为是抗原的配基.将一个水溶性配基在不伤害其生物学功能的情况下与水不溶性载体结合称为配基的固相化.
亲和色谱法的基本过程是:
1.配基固相化.将与纯化对象有专一结合作用的物质,连接在水不溶性载体上,制成亲和吸附剂后装柱(称亲和住).
2.亲和吸附.将含有纯化对象的混合物通过亲和柱,纯化对象吸附在柱上,其他物质流出色谱柱.
3.解吸附.用某种缓冲液或溶液通过亲和柱,把吸附在亲和柱上的欲纯化物质洗脱出来
亲和色谱具有高选择、高活性回收率和高纯度等特点,已成为生物工程中分离纯化最有效的技术之一,是生物化工研究的重要方向.
举一反三
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