质粒酶切后,目的片段DNA是小片段,琼脂糖电泳图目的条带太暗,怎么增加亮度?
题目
质粒酶切后,目的片段DNA是小片段,琼脂糖电泳图目的条带太暗,怎么增加亮度?
我的目的条带在200bp左右,酶切跑胶,能看见目的条带,但是太暗了,怎么能够增加亮度啊?
补充:我用的琼脂糖凝胶浓度是1.5%,酶切体系是20uL,上样量也是20ul,工作液中的EB浓度是0.6%.
怎么改进实验啊?
是目的条带太暗(小片段),切开的大片段挺亮的,而且加了质粒对照了,质粒也比较亮(加了3ul)
答案
你没怎么说清楚.首先,是大片段和小片段(目的条带)都暗,还是只有小片段暗?如果都很暗,可能是酶切体系中的质粒加的不够多,或者是你提取的质粒浓度不高.如果是只有小片段很暗,那就说明内切酶没把质粒切开,你要注意一...
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