怎么计算Tm值?

题目

怎么计算Tm值?
某DNA分子的（A+T）含量为90%其Tm值为多少?
计算公式（G+C）%=（Tm-69.3）*2.44
这里面的G+C是用百分比10%还是用10?得数有两个69.3还是73.
现在这是道计算题，我想求正确答案！

答案

引物长度,碱基组成,引物使用缓冲的离子强度有关.
长度为25mer以下的引物,Tm计算公式为：Tm = 4℃(G + C)+ 2℃(A + T)
对于更长的寡聚核苷酸,Tm计算公式为：
Tm = 81.5 + 16.6 x Log10[Na+] + 0.41 (%GC) – 600/size
公式中,Size = 引物长度.
用Primer5.0,DNA MAN,DNA STAR都可以算,我从来没自己算过.