图1表示含有目的基因D的DNA片段长度(bp即碱基对)和部分碱基序列,图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列。现有MspⅠ、BamHⅠ、MboⅠ、SmaⅠ4种限制
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图1表示含有目的基因D的DNA片段长度(bp即碱基对)和部分碱基序列,图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列。现有MspⅠ、BamHⅠ、MboⅠ、SmaⅠ4种限制性核酸内切酶切割的碱基序列和酶切位点分别为C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG。请回答下列问题: |
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(1)图1的一条脱氧核苷酸链中相邻两个碱基之间依次由___________连接。 (2)若用限制酶SmaⅠ完全切割图1中DNA片段,产生的末端是___________末端,其产物长度为____________。 (3)若图1中虚线方框内的碱基对被T-A碱基对替换,那么基因D就突变为基因d。从杂合子分离出图1及其对应的DNA片段,用限制酶SmaⅠ完全切割,产物中共有___________种不同DNA片段。 (4)若将图2中质粒和目的基因D通过同种限制酶处理后进行,形成***质粒,那么应选用的限制酶是____________。在导入***质粒后,为了筛选出含***质粒的大肠杆菌,一般需要用添加__________的培养基进行培养。经检测,部分含有***质粒的大肠杆菌菌株中目的基因D不能正确表达,其最可能的原因是____________。 |
答案
(1)脱氧核糖、磷酸、脱氧核糖 (2)平 537bp、790bp、661bp (3)4 (4)BamHⅠ 抗生素B 同种限制酶切割形成的末端相同,部分目的基因D与质粒反向连接 |
举一反三
生物分子间的特异性结合的性质广泛用于生命科学研究。以下实例为体外处理“蛋白质-DNA复合体”获得DNA片段信息的过程图。据图回答: |
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(1)过程①酶作用的部位是 键,此过程只发生在非结合区DNA,过程②酶作用的部位是 键。 (2)①、②两过程利用了酶的 特性。 (3)若将得到的DNA片段用于构建***质粒,需要过程③的测序结果与 酶的识别序列进行对比,已确定选用何种酶。 (4)如果复合体中的蛋白质为RNA酶聚合,则其识别、结合DNA序列位基因的 。 (5)以下研究利用了生物分子间的特异性结合的有 (多选) A.分离得到核糖体,用蛋白酶酶解后提rRNA B.用无水乙醇处理菠菜叶片,提取叶绿体基粒膜上的光合色素 C.通过分子杂交手段,用荧光物质标记的目的基因进行染色体定位 D.将抑制成熟基因导入番茄,其mRNA与催化成熟酶基因的mRNA互补结合,终止后者翻译,延迟果实成熟。 |
天然的玫瑰没有蓝色花,这是由于缺少控制蓝色色素合成的基因B,而开蓝色花的矮牵牛中存在序列已知的基因B。现用基因工程技术培育蓝玫瑰,下列操作正确的是 |
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A.提取矮牵牛蓝色花的mRNA,经逆转录获得互补的DNA,再扩增基因B B.利用限制性核酸内切酶从开蓝色花矮牵牛的基因文库中获取基因B C.利用DNA聚合酶将基因B与质粒连接后导入玫瑰细胞 D.将基因B直接导入大肠杆菌,然后感染并转入玫瑰细胞 |
下列不是基因工程中的目的基因的检测手段的是 |
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A.分子杂交技术 B.抗原—抗体杂交 C.抗虫或抗病的接种实验 D.基因枪法 |
用某人的胰高血糖素基因制成的DNA探针,检测下列物质,能形成杂交分子的是 |
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A.该人的胰岛B细胞中的DNA B.该人的胰岛A细胞的mRNA C.该人的成熟红细胞中的DNA D.该人的胰岛B细胞中的mRNA |
在用基因工程技术构建抗除草剂的转基因烟草过程中,下列操作错误的是 |
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A.用限制性核酸内切酶切割烟草花叶病毒的核酸 B.用DNA连接酶连接经切割的抗除草剂基因和载体 C.将***DNA分子导入烟草原生质体 D.用含除草剂的培养基筛选转基因烟草细胞 |
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