如何扩增及提取表达载体?是不是导入感受态细胞培养,然后直接提取质粒就可以?怎么确是我的表达载体质粒

题目

如何扩增及提取表达载体?是不是导入感受态细胞培养,然后直接提取质粒就可以?怎么确是我的表达载体质粒
如何扩增及提取表达载体?是不是导入感受态细胞培养,然后直接提取质粒就可以?怎么确提取的质粒是我的表达载体质粒

答案

不对,通过转化到感受态细菌中,不是细胞.感受态的大肠杆菌,可以自己制作也可以通过购买.之后将细菌凃到含有抗生素的板子上,长出克隆后挑取单克隆,将单克隆加入含有抗生素的细菌培养基中培养,之后提取质粒,提取质粒可以购买相应的试剂盒,按照试剂盒的说明书操作即可.质粒是带有抗性基因的,只有含有该质粒的细菌才能在含有对应抗生素的培养基中存活并增殖,这样就能确保是你的表达载体质粒.当然为了防止杂菌的污染,整个过程中最好是无菌操作.而表达载体质粒有可能出现突变等情况,所以可以在提出质粒之后,取少量质粒送测序,来确保序列的无误.