如何通过实验验证所研究的一个蛋白质A在大肠杆菌中是否获得了表达?
题目
如何通过实验验证所研究的一个蛋白质A在大肠杆菌中是否获得了表达?
前辈,再问一道.
答案
最基本和常用的简单廉价方法
1.首先 你要知道这个A蛋白的分子量.
2. 按照正常的基因工程方法做好重组表达质粒,对其进行(诱导)过表达,用宿主菌株作为对照.
3.对2种不同的菌株进行分别发酵培养后,按照常规,离心取菌、破碎细胞、提取全蛋白、进行PAGE 电泳(加上适宜分子量范围的蛋白质标准,marker),对比2种细菌的PAGE结果,检查在A分子量位置处 过表达菌株是否有粗带形成,若有说明表达了,否则跟对照菌株一样的话,则说明未表达.
举一反三
已知函数f(x)=x,g(x)=alnx,a∈R.若曲线y=f(x)与曲线y=g(x)相交,且在交点处有相同的切线,求a的值和该切线方程.
我想写一篇关于奥巴马的演讲的文章,写哪一篇好呢?为什么好
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