动物染色体标本制备的原理及主要步骤

题目

动物染色体标本制备的原理及主要步骤

答案

1)动物的选择,一般用小鼠,其繁殖能力强,易于饲养.我们常用的是它们的骨髓细胞和精巢,因其分裂指数较高,不用体外培养就可以得到分裂中期的细胞.
2)秋水仙素用量要注意,太多或处理时间过长,会导致染色体的过分凝缩或着丝点裂解,最终会引起染色体形态不正常,甚至被破坏或溶解.
3) 低渗处理很关键.低渗液的量、处理时间均与细胞的数量有关.低渗过度,细胞会破裂；低渗不足则染色体在一起,分散不开.
4) 离心速度或离心时间也能影响染色体标本的制备.离心速度过大或离心时间过长,则会引起细胞破裂；反之,离心速度过小或离心时间过短,则细胞沉降不下来,则会引起大量细胞的丢失.
5) 固定液要随用随配,固定彻底后再打散细胞团块,否则细胞容易破碎,染色体分散亦受到影响.
6) 载玻片要预冷.冷却不够,则会影响染色体的附着和铺展.
7) 用吸管吹散细胞时用力必须尽量轻柔,用力过大则会造成细胞破裂,而染色体也会弥散在溶液中,在随后的离心中将会丢失.
8) 滴片时的高度很重要,高度过低细胞不会破裂；过高则染色体过于分散甚至丢失,无法辨别出染色体的准确数量.