几种细胞固定方法

题目

几种细胞固定方法

答案

选择最佳固定液标准是：x0d（1）最好地保持细胞和组织的形态结构；x0d（2）最大限度地保存抗原的免疫活性.一些含重金属的固定液在免疫组化和细胞化学技术中是禁用的；x0d（3）不要用可能带有自发荧光的固定剂,如带有苦味酸的固定剂,还有甲醛升汞固定液,会使上皮细胞产生非特异性荧光；x0d（4）固定剂的选择、固定时间、温度和PH值都会影响实验结果.x0d单纯固定液（1）4%中性甲醛固定液：最常用的固定液,能满足常规HE及免疫组化、PCR等工作（Job）.中性甲醛是以PH7.2-7.4的磷酸缓冲液为溶剂配制的,其固定效果及对组织抗原性的保存均优于一般的4%甲醛固定液.此固定液配制后应密封并保存在阴凉处,保存时间不超过一个月.x0d甲醛（40%） 100mlx0d无水磷酸氢二钠 6.5gx0d磷酸二氢钠 4.0gx0d蒸馏水 900mlx0d（2）乙醇固定液：使用时以80%-95%的浓度为宜,具有硬化、固定、脱水等作用,对组织渗透力较弱,因此很少单独使用,但其保存组织中的核酸强于中性甲醛,故常用于有核酸操作的实验或检查,假如用于证实尿酸结晶和保存糖原,可用于100%乙醇固定组织.x0d（3）4%多聚甲醛固定液：主要用于培养细胞的固定.x0d混合固定液（1）乙醇-甲醛（乙醇-福尔马林,AF）固定液：适用于皮下组织中肥大细胞的固定.该固定液有固定兼脱水作用,固定后的标本可直接入95%乙醇脱水.x0d甲醛（40%） 100mlx0d95%乙醇 900mlx0d（2）B5（醋酸钠-升汞-甲醛）固定液：多用于固定淋巴组织.染色前应进行脱汞沉淀处理.x0d无水醋酸钠 1.25g升汞 6.0g蒸馏水 90mlx0d使用前加入甲醛 10mlx0d（3）Bouin固定液：非凡适用于睾丸活检组织的固定.Bouin液对组织固定较均匀,收缩很少,不会使组织变硬变脆.需现配现用.x0d饱和苦味酸水溶液（约1.22%） 75ml甲醛 25ml冰醋酸 5ml（4）Carnoy固定液：穿透能力强,可很好的固定细胞质和细胞核,非凡适用于固定外膜致密的组织,也适用于糖原及尼氏小体的固定.x0d无水乙醇 60ml氯仿 30ml冰醋酸 10mlx0d（5） Zenker固定液：经此液固定的标本,细胞核和细胞质染色颇为清楚,但成本较高且需非凡处理汞.该固定液要避免接触阳光,以免引起化学变化而失效.x0d升汞 5.0gx0d重铬酸钾 　　　　　　　2.5gx0d蒸馏水（加至）　　　　100ml