已知pI值为6.2,如何从肝中分离提取纯化鉴定某种酶
题目
已知pI值为6.2,如何从肝中分离提取纯化鉴定某种酶
最好有实验步骤
答案
1).脱脂肝粉制备:将新鲜动物肝脏切成碎块、搅碎、充分匀浆,然后加入丙酮后离心,收集沉淀,干燥.然后将肝粉颗粒研磨、过筛、收集细粉,加入三氯甲烷充分搅拌,抽滤,重复两次,收集滤饼、干燥.
2).酶粗品制备:将肝粉用氨水溶液恒温抽提两次,合并滤液.将所得水溶液用乙酸溶液酸化、离心,收集上清液.然后调PH至中性,用硫酸铵初次盐析、离心、收集上清,再次盐析、收集沉淀,得酯酶粗品.
3).精制:将粗品用磷酸盐缓冲液溶解后,经过阴、阳离子交换层析柱纯化,接收主峰,浓缩,然后再经过凝胶层析柱分离,接收主产物峰.
4)超滤、浓缩、冻干.将收集的溶液用微孔滤膜预过滤后,超滤、浓缩、冻干.
举一反三
已知函数f(x)=x,g(x)=alnx,a∈R.若曲线y=f(x)与曲线y=g(x)相交,且在交点处有相同的切线,求a的值和该切线方程.
我想写一篇关于奥巴马的演讲的文章,写哪一篇好呢?为什么好
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