在进行细胞培养的各种消毒操作中,应注意的安全事项有哪些?

题目

在进行细胞培养的各种消毒操作中,应注意的安全事项有哪些?

答案

器械的清洗和消毒
玻璃器械洗消：
(1)新的玻璃器皿的洗消：
1.自来水刷洗,除去灰尘.
2.烘干、泡盐酸：烤箱中烘干,然后再浸入5％稀盐酸中12小时以除去脏物、铅、砷等物.
3.刷洗、烘干：12小时后立即用自来水冲洗,再用洗涤剂刷洗,自来水冲干净后用烤箱烘干.
4.泡酸、清洗：用清洁液（重铬酸钾120g：浓硫酸200ml：蒸馏水1000ml）浸泡12小时,然后从酸缸内捞出器皿用自来水冲洗15次,最后蒸馏水冲洗3-5次和用双蒸水过3次.
5.烘干、包装：洗干净后先烘干,然后用牛皮纸（油光纸）包装.
6.高压消毒：包装好的器皿装入高压锅内盖好盖子,打开开关和安全阀,当蒸气成直线上升时,关闭安全阀,当指针指向15磅时,维持20-30分钟.
7.高压消毒后烘干
(2)旧的玻璃器皿的洗消：
1．刷洗、烘干：使用过的玻璃器皿可直接泡入来苏尔液或洗涤剂溶液中,泡过来苏尔溶液（洗涤剂）的器皿要用清水刷洗干净,然后烘干.
2.泡酸、清洗：烘干后泡入清洁液（酸液）,12小时后从酸缸内捞出器皿立即用自来水冲洗（避免蛋白质干涸后粘附于玻璃上难以清洗）,再用蒸馏水冲洗3次.
3.烘干、包装：洗干净的器皿烘干后取出用牛皮纸（油光纸）等包装,以便于消毒储存及防止灰尘和再次被污染.
4.高压消毒：包装好的器皿装入高压锅内,盖好盖子,打开开关和安全阀,随着温度的上升安全阀冒出蒸气,当蒸气成直线冒出3-5分钟后,关闭安全阀,气压表指数随之上升,当指针指向15磅时,调节电开关维持20-30分钟即可.（玻璃培养瓶消毒前可将胶帽轻轻盖上）
5.烘干备用：因为高压消毒后器皿会被蒸气打湿,所以要放入烤箱内烘干备用.
金属器械洗消：
金属器皿不能泡酸,洗消时可先用洗涤剂刷洗,后用自来水冲干净,然后用75％酒精擦拭,再用自来水,然后用蒸馏水冲洗,再烘干或空气中晾干.放入铝制盒内包装好在高压锅内15磅高压（30分钟）消毒,再烘干备用.
橡胶和塑料：
橡胶和制品通常处理方法是：先用洗涤剂洗刷干净,再分别用自来水和蒸馏水冲干净,再用烤箱烘干,然后根据不同品质进行如下的处理程序：
1 .针式滤器帽不能泡酸液,用NaOH泡6-12小时,或者煮沸20分钟,在包装之前要装好滤膜两张,安装滤膜时注意光面朝上(凹向上),然后将螺旋稍微拧松一些,放入铝盒中在高压锅内15磅30分钟消毒,再烘干备用.注意在超净台内取出使用时应该立即将螺旋旋紧.
2.胶塞烘干后用2％氢氧化钠溶液煮沸30分钟（用过的胶塞只要用沸水处理30分钟）,自来水洗净,烘干.然后再泡入盐酸液30分钟,再用自来水,蒸馏水,三蒸水洗净,烘干.最后装入铝盒内高压消毒,烘干备用.
3.胶帽,离心管帽烘干后只能在2％氢氧化钠溶液中浸泡6-12小时（切记时间不能过长）,自来水洗净,烘干.然后再泡入盐酸液30分钟,再用自来水,蒸馏水,三蒸水洗净,烘干.最后装入铝盒内高压消毒,烘干备用.
4.胶头可用75％酒精浸泡5分钟,然后紫外照射后使用即可.
5.塑料培养瓶,培养板,冻存管：
6.其他消毒方法：有的物品既不能干燥消毒,又不能蒸气消毒,可用70％酒精浸泡消毒.塑料培养皿打开盖子,放在超净台台面上,直接暴露在紫外线下消毒.也可用氧化乙烯消毒塑料制品,消毒后需要用2—3周时间洗除残留的氧化乙烯.用20000—100000rad的r射线消毒塑料制品效果最好.
为了防止清洗器材已消毒与末消毒发生混淆,可在纸包装后,用密写墨水作好标记.其法即用沾水笔或毛笔沾以密写墨水,在包装纸上作一记号,平时这种墨水不带痕迹,一经高温,即出现字迹,从而可以判定它们是否消毒.密写墨水的配制：氯化钻(CoC12·6H2o)2g,30％盐酸10m1,蒸馏水88m1.
注意事项：
1.严格执行高压锅的操作规程：高压消毒时,先检查锅内是否有蒸馏水,以防高压时烧干,水不能过多因为其将使空气流畅受阻,会降低高压消毒效果.检查安全阀是否通畅,以防高压时爆炸.
2.安装滤膜时注意光面朝上：注意滤膜光滑一面是正面,要朝上,否则起不到过滤的作用.
3.注意人体的防护和器皿的完全浸泡：A.泡酸时要戴耐酸手套,防止酸液溅起伤害人体.B.从酸缸内捞取器皿时防止酸液溅到地面,会腐蚀地面.C.器皿浸入酸液中要完全,不能留有气泡,以防止泡酸不彻底.