请选出下列正确的操作步骤①土壤取样 ②称取10g土壤，加入盛有90ml无菌水的锥形瓶中 ③吸取0.1ml进行平板涂布 ④依次稀释至101、102、103、104

题型：0103 期末题难度：来源：

请选出下列正确的操作步骤
①土壤取样 ②称取10g土壤，加入盛有90ml无菌水的锥形瓶中 ③吸取0.1ml进行平板涂布 ④依次稀释至10¹、10²、10³、10⁴、10⁵、10⁶、10⁷稀释度[ ]
A．①→②→③→④
B．①→③→②→④
C．①→②→④→③
D．①→④→②→③

答案

举一反三

尿素是尿素分解菌的氮源，因此在配制培养基时

[ ]

A．葡萄糖在培养基中越多越好
B．尿素分解菌有固氮能力，故培养基中只需无机氮
C．尿素在培养基中越少越好
D．尿素分解菌无固氮能力，故培养基中的尿素为化合态氮

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要将从土壤中提的自生固氮菌与其他细菌分离开来，应将它们接种在[ ]
A．加入伊红美蓝的鉴别培养基上
B．加入青霉素的固体培养基上
C．不需加氮源的选择培养基上
D．含五大类营养要素的培养基上

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下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述，其中错误的是

[ ]

A．用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板
B．取10⁴、10⁵、10⁶倍的土壤稀释液和无菌水各0.1mL，分别涂布于各组平板上
C．将实验组和对照组平板倒置，37℃恒温培养24～48小时
D．确定对照组无菌后，选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数

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下面是本课题将用到的培养基配方，请根据下表回答下面的问题。

(1)在该培养基的配方中，为微生物提供碳源的是____，提供氮源的是____。
(2)绝大多数微生物都能利用________，但是，只有能合成脲酶的微生物才能分解____。
(3)分析该培养基的配方，该培养基对微生物是否具有选择作用？如果具有，又是如何进行选择的？

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探究如何从土壤中分离自生固氮菌与计数。
实验原理：农田的表层土壤中，自生固氮菌的含量比较多。将用表层土壤制成的稀泥浆，接种到无氮培养基上进行培养。在这种情况下，只有自生固氮菌才能生长繁殖。用这种方法，可以将自生固氮菌与其他细菌分离开来。
材料用具：农田的表层土壤、无氮培养基、牛肉膏蛋白胨培养基、盛9mL无菌水的大试管若干。无菌移液管、无菌涂布器、无菌培养皿、盛90mL无菌水的锥形瓶、酒精灯、恒温箱。
方法步骤：
(1)倒平板。分别将无氮培养基、牛肉膏蛋白胨培养基倒平板，应在___________操作。
(2)制备土壤稀释液。取土样10g加入盛有90mL无菌水的锥形瓶中，充分摇匀。用无菌移液管吸取上清液1mL，转至9mL无菌水的大试管中，依次稀释到10⁷倍稀释度。为实现无菌操作，试管口和移液管应在离火焰____cm处。
(3)涂布。按照由107~103稀释度的顺序分别吸取0.1mL进行平板涂布，每个稀释度下，无氮培养基应至少涂布____个平板，牛肉膏蛋白胨培养基涂布____个平板。
(4)培养。放入恒温箱内，在适宜温度条件下培养3d～4d。一般每隔____小时统计一次，选取____时的记录作为结果，这样可以防止____。
(5)细菌的计数。当菌落数目稳定时，选取菌落数在___________的平板进行计数。如果测试的平均值为50，则每克样品中的菌落数是___________。(稀释度是10⁵)
(6)预期结果。相同稀释度下，牛肉膏蛋白胨平板上的菌落数____(填“多于”或“少于”)无氮培养基上的数目。理由是______________。

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