图为DNA分子的切割和连接过程。(1)EcoRⅠ是一种_______酶，其识别序列是________，切割位点是_______与_______之间的______ - 高中生物试题 - 超级试练试题库

图为DNA分子的切割和连接过程。(1)EcoRⅠ是一种___酶，其识别序列是，切割位点是_与_之间的__

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图为DNA分子的切割和连接过程。

(1)EcoRⅠ是一种_______酶，其识别序列是________，切割位点是_______与_______之间的_______键。切割结果产生的DNA片段末端形式为____。
(2)不同来源的DNA片段结合，在这里需要的酶应是_______连接酶，此酶的作用是在______与_______之间形成_______键而起“缝合”作用。还有一种连接平末端的连接酶是__________。

答案

(1)限制性核酸内切 GAATTC 鸟嘌呤脱氧核苷酸腺嘌呤脱氧核苷酸磷酸二酯黏性末端
(2)E·coliDNA 鸟嘌呤脱氧核苷酸腺嘌呤脱氧核苷酸磷酸二酯 T₄DNA连接酶

举一反三

下列技术依据DNA分子杂交原理的是
①用DNA分子探针诊断疾病 ②B淋巴细胞与骨髓瘤细胞的杂交 ③快速灵敏的检测饮用水中病毒的含量 ④目的基因与运载体结合形成***DNA分子[ ]
A．②③
B．①③
C．③④
D．①④

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下列关于基因工程的叙述，错误的是

[ ]

A．目的基因和受体细胞均可来自动、植物或微生物
B．限制性核酸内切酶和DNA连接酶是两类常用的工具酶
C．人胰岛素原基因在大肠杆菌中表达的胰岛素原无生物活性
D．载体上的抗性基因有利于筛选含***DNA的细胞和促进目的基因的表达

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目的基因与运载体结合所需的条件是
①同一种限制酶 ②具有标记基因的质粒 ③RNA聚合酶 ④目的基因 ⑤DNA连接酶 ⑥四种脱氧核苷酸 ⑦ATP

[ ]

A．①②③④⑤⑥⑦
B．①②④⑤⑥⑦
C．①②③④⑤
D．①②④⑤⑦

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下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点，请回答下列问题：

(1)一个图1所示的质粒分子经SmaⅠ切割前后，分别含有_______个游离的磷酸基团。
(2)若对图中质粒进行改造，插入的SmaⅠ酶切位点越多，质粒的热稳定性越_____。
(3)用图中的质粒和外源DNA构建***质粒，不能使用SmaⅠ切割，原因是_____。
(4)与只使用EcoRⅠ相比较，使用BamHⅠ和HindⅢ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止____。
(5)为了获取***质粒，将切割后的质粒与目的基因片段混合，并加入_____酶。
(6)***质粒中抗生素抗性基因的作用是为了_______。
(7)为了从cDNA文库中分离获取蔗糖转运蛋白基因，将***质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体，然后在_______的培养基中培养，以完成目的基因表达的初步检测。

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苏云金杆菌(Bt)能产生具有***虫能力的毒素蛋白。下图是转Bt毒素蛋白基因植物的培育过程示意图(ampr为抗氨苄青霉素基因)，据图回答下列问题。

(1)将图中①的DNA用HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后，反应管中有_______种DNA片段。
(2)图中②表示HindⅢ与BamHⅠ酶切、DNA连接酶连接的过程，此过程可获得______种***质粒；如果换用BstⅠ与BamHⅠ酶切，目的基因与质粒连接后可获得_______种***质粒。
(3)目的基因插入质粒后，不能影响质粒的______。
(4)图中③的Ti质粒调控合成的vir蛋白，可以协助带有目的基因的T-DNA导入植物细胞，并防止植物细胞中_______对T-DNA的降解。
(5)已知转基因植物中毒素蛋白只结合某些昆虫肠上皮细胞表面的特异受体，使细胞膜穿孔，肠细胞裂解，昆虫死亡。而该毒素蛋白对人类的风险相对较小，原因是人类肠上皮细胞________。
(6)生产上常将上述转基因作物与非转基因作物混合播种，其目的是降低害虫种群中的_________基因频率的增长速率。

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