北极比目鱼中有抗冻基因，其编码的抗冻蛋白具有11个氨基酸的重复序列，该序列重复次数越多，抗冻能力越强。下图是获取转基因抗冻番茄植株的过程示意图，有关叙述正确的是

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A．过程①获取的目的基因，可用于基因工程和比目鱼基因组测序
B．将多个抗冻基因编码区依次相连成能表达的新基因，不能得到抗冻性增强的抗冻蛋白
C．过程②构成的***质粒缺乏标记基因，需要转入农杆菌才能进行筛选
D．应用DNA探针技术，可以检测转基因抗冻番茄植株中目的基因的存在及其完全表达

答案

举一反三

T-DNA可能随机插入植物基因组内，导致被插入基因发生突变。用此方法诱导拟南芥产生突变体的过程如下：种植野生型拟南芥，待植株形成花蕾时，将地上部分浸入农杆菌(其中的T-DNA上带有抗除草剂基因)悬浮液中以实现转化。在适宜条件下培养，收获种子(称为T₁代)。
(1)为促进植株侧枝发育以形成更多的花蕾，需要去除________，因为后者产生的________会抑制侧芽的生长。
(2)为筛选出已转化的个体，需将T₁代播种在含____________的培养基上生长，成熟后自交，收获种子(称为T₂代)。
(3)为筛选出具有抗盐性状的突变体，需将T₂代播种在含____________的培养基上，获得所需个体。
(4)经过多代种植获得能稳定遗传的抗盐突变体。为确定抗盐性状是否由单基因突变引起，需将该突变体与________植株进行杂交，再自交________代后统计性状分离比。
(5)若上述T-DNA的插入造成了基因功能丧失，从该突变体的表现型可以推测野生型基因的存在导致植物的抗盐性______________________。
(6)根据T-DNA的已知序列，利用PCR技术可以扩增出被插入的基因片段。其过程是：提取________植株的DNA，用限制酶处理后，再用________将获得的DNA片段连接成环(如下图所示)，以此为模板，从图中A、B、C、D四种单链DNA片断中选取________作为引物进行扩增，得到的片段将用于获取该基因的全序列信息。

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应用转基因技术可生产人类所需要的转基因产品，如利用大肠杆菌生产人胰岛素。下列选项中能说明人胰岛素基因完成了在受体细胞中表达的是

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A．在大肠杆菌细胞中检测到人的胰岛素基因
B．在大肠杆菌中检测到人胰岛素基因转录出的mRNA
C．在含有四环素的培养基中培养出大肠杆菌
D．在大肠杆菌的代谢产物中提取到人胰岛素

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我国科学家周光宇创立了将外源DNA导入植物的新技术—花粉管通道法。该技术是利用植物受精后花粉萌发形成的花粉管通道，将目的基因导入尚不具备细胞壁的受精卵中，进而形成含有目的基因的种子。经培养、筛选，可获得有特定性状的转基因植株。下列有关说法中错误的是

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A．获得目的基因时需要限制性内切酶
B．通过组织培养才能获得相应的植株
C．不需要利用抗生素标记基因进行筛选
D．一般需经多代自交才能得到目的性状稳定的后代

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2008年诺贝尔化学奖授予了三位在研究绿色荧光蛋白(GFP)方面作出突出贡献的科学家。绿色荧光蛋白(GFP)会发出绿色荧光，可借助荧光跟踪蛋白质在细胞内部的移动情况，帮助推断蛋白质的功能。下图表示培育绿色荧光小鼠的基本流程，请根据上述材料回答下列问题：

(1)上述流程中，作为目的基因的是__________。
(2)在培育绿色荧光小鼠的过程中，基因表达载体的构建是核心。一个完整的基因表达载体至少包括目的基因、启动子、终止子、__________基因等部分。
(3)过程①用到的工具酶有___________，过程②采用的方法是______________，过程③利用的生物技术是___________。
(4)为迅速增加绿色荧光小鼠的数量，可采用试管动物技术。在这项技术中，首先要做的是体外受精和早期胚胎的培养。哺乳动物的体外受精主要包括__________、精子的获取和受精等几个主要步骤。
(5)为提高胚胎的利用率，可采用________技术，应该选择发育良好、形态正常的____________或囊胚进行分割。在对囊胚阶段的胚胎进行分割时，要注意将____________进行均等分割。

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下列获取目的基因的方法中需要模板的是
①从基因文库中获取目的基因 ②利用PCR技术扩增目的基因 ③反转录法 ④通过DNA合成仪利用化学方法人工合成DNA[ ]
A．①②③④
B．①②③
C．②③④
D．②③

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