紫外分光光度计的使用步骤是什么?

题目

紫外分光光度计的使用步骤是什么?

答案

仪器名称：紫外/可见分光光度计系统
使用方法：开机步骤
1 开光谱仪电源
2 开计算机电源
3 在文件管理器中用鼠标指按UV WinLab图标,此时出现UV WinLab的应用窗口,仪器已准备好,可选用适当方法进行分析操作.
2 方法：在分析中必须对分光光度计设定一些必要的参数,这些参数的组合就形成一个“方法”.Lambda系列UV WinLab软件预设四类常用方法.
1）扫描（SCAN）,用以进行光谱扫描.
2）时间驱动（TIME DRIVER）,用以观察一定时间内某种特定波长处纵坐标值的变化,如酶动力学.
3）波长编程（WP）用以在多个波长下测定样品在一定时间内的纵坐标值变化,并可以计算这些纵坐标值的差或比值.
4）浓度（CONC）用以建立标准曲线并测定浓度.
2.1 进入所需方法,在方法窗口中选择所需方法的文件名.
2.2 方法的设定
2.2.1 扫描、波长编程及时间驱动
各项方法可根据显示的参数表,逐项按需要选用或填入,并可参考提示.
2.2.2 浓度
浓度方法窗口下方标签较多,说明做浓度测定时需要参数较多.用鼠标指按每一标签,可翻出下页,其上有一些需要测定的参数.必须逐页设定.
3 工具条
3.1 SETUP
当所需的各项参数都已在参数中设好后,必须用鼠标指按SETUP,才能将仪器调整到所设状态.
3.2 AUTOZERO
用鼠标指按此键,分光光度计即进行调零（在光谱扫描中则进行基线校正）.
3.3 START
用鼠标指按此键,光度计即开始运行所设定的方法.
4 方法运行
4.1 扫描,时间驱动,波长编程
方法选好后,先放入参比溶液,按AUTOZERO键,进行自自动校零或背景校正结束后再放入样品,按START,分光光度计即开始进行,同时屏幕上出现图形窗口,将结果显示出来.
4.2 浓度
4.2.1制订标准曲线
1 方法选好后,确认各项数据正确,特别是REFS页中第一行要选中右上角的“edit mode”.再放入参比溶液,按AUTOZERO键自动校零或背景校正.
2 按setup,待该图标消失后,再按“start”,按提示依次放入标准色列的各管溶液,每次都按提示进行操作.
3 标准色列测定
完毕后,屏幕上出现calibgraphwindow,显示拟合的标准线,并标出各项标准管的位置,屏幕下方还有一条Concentration mode的对话框,可以用来修改拟合的曲线类型（按 change calbration）,或修改标准溶液的任何一管（replace）,或取消某一管（delete）,或增加标准溶液管数（add）.如过已经满意,则按analyse sample键,进入样品测定窗口.
4 标准曲线有关的各项数据,均在calibresultwindow中,可用鼠标将其调出观察.其中包括每个标准溶液的具体数据,标准曲线的回程方程式,相关系数,残差.
4.2.2样品浓度测定
4.2.2.1刚制定好的标准曲线接着进行样品浓度测定时
1 只需在concentration mode对话框按analyse sample键,进入样品测定窗口.
2 按设定的样品顺序放入各样品管,每次按提示进行操作.
3 屏幕上出现结果窗口,结果数据将依次显示在样品表中的相应位置.
4.2.2.2利用原有的标准曲线接着进行样品浓度测定时
4.2.2.2.1 调出所测定样品的浓度方法文件,首先调出refs页,将原设edit mode选项取消,改设左上角的using exiting
calibration.重新将方法存盘,则今后再调用时即不需再作修改.
4.2.2.2.2 在sample页中按要求重设各种样品名称机样品信息.
4.2.2.2.3 按工具条中setup键,将主机设到该方法所设定的条件.
4.2.2.2.4 将参比溶液放入比色室,按autozero键做背景校零.
4.2.2.2.5 按start键,按设定的样品顺序放入各样品管,每次按提示进行操作.
4.2.2.2.6 屏幕上出现结果窗口,结果数据将依次显示在样品表中相应位置.