SDS-PAGE跑了4、5回了,条带颜色总是特别浅看不清楚,连MARKER都看不清楚,是怎么回事啊?

题目

SDS-PAGE跑了4、5回了,条带颜色总是特别浅看不清楚,连MARKER都看不清楚,是怎么回事啊?
连着练了好几天了,每次都不出结果,
用相同的样品在别人制的胶上面跑出来就看的清楚,不知道制胶的时候什么最影响条带深浅啊
这两天又跑了好几次，没有一次成功，都是条带颜色浅。
重新配制了分离胶缓冲液和浓缩胶缓冲液，APS也是新配的。样品是昨天新制的，跑出来还是颜色浅，MARKER分别用了两种，颜色都很浅。
染色液是考马斯亮蓝，昨天也新配了。
真不知道是什么原因了。
有一点，我用别人的分离胶缓冲液的时候，分离胶跑1小时就到头了，用我自己配的要跑1个半小时，不知道和条带颜色浅有没有关系，条带形状是正常的。

答案

1 上样量太少,或者电泳时候loading buffer不行,导致蛋白跑了
2 脱色时间不够,建议K-G染色后,脱色液在30min内换两次
3 重新按标准配置电泳缓冲液.