SDS法和分子筛测得血红蛋白分子量不同,为什么?

题目

SDS法和分子筛测得血红蛋白分子量不同,为什么?

答案

原理不同的测定方法 测定结果都是不同的.其实没有哪种方法是金标准（除过氨基酸测序后.）,不同方法互为补充而已.结果不对应是正常的.
PG-PAGE 测定结果相对更为准确,可作为补充.
带有较大辅基的蛋白质(如糖户血红蛋白)及一些结构异常的蛋白等测出的Mr不太可靠.
如糖蛋白和某些酶(如葡萄糖氧化酶、木瓜蛋白酶以及胃蛋白酶等)与SDS的亲和力较低,测到的分子量偏低；
组蛋白F1,本身带有大量正电荷：虽然结合了正常量的SDS,仍不能完全掩盖其原有正电荷,结果使运动速度减慢.故用SDS-PAGE测得的Mr要大.
而含二硫键多的蛋白质,二硫键被打开后,致使Stokes半径增加,迁移率减慢；因此,一般测出的分子量是偏高的.