做MTT时,96孔培养板细胞浓度该是多少?

题目

做MTT时,96孔培养板细胞浓度该是多少?

答案

博凌科为我觉得细胞的浓度并不需要那么精确,关键是接种于每孔的细胞数就大致处于同一水平.比如我做MTT,起初用的细胞浓度为5000/ml,每孔100ul,培养3天观察,发现细胞数太少,各孔OD值反面难于比较.后来我换用 10000/ml,结果就很好.当然细胞数也不能太多,这其实取决于你细胞的生长速度,生长快的细胞,可接种浓度低点.这主要是使细胞增殖率不致受处理因素之外的其他因素影响,比 如接触抑制,营养竞争.总之,做MTT时细胞数应较低,目的就是为了排除其他因素的影响,以使每孔细胞生长情况尽可能地反映出处理因素的影响.细胞接种的浓度和你的实验目的、要求、细胞种类、处理因素的特殊要求都有关系.没有简单的,每孔接种多少的一个标准.当然,可以用楼上建议的浓度开 始摸索.同时,注意肿瘤细胞核正常细胞的生长数度也不一样,前者生长快,后者慢,细胞数的量也有讲究.到底多少合适,得根据你的实验具体要求来摸索.我做 b16转染时,因为脂质体要求细胞融合度为30%-50%,曾经没孔接种过300-500个细胞,效果非常好,