许多禾谷类植物种子发芽时,胚产生赤霉素扩散到种子糊粉层,诱导合成α-淀粉酶,α-粉酶再分泌到胚乳中,使储藏的淀粉分解,为胚生长发育提供物质和能量。某研究性学习小组为了验证赤霉素诱导α-淀粉酶的形成,进行了以下实验: (1)实验材料用具:大麦种子、0.1%淀粉溶液、浓度分别为2×10-5mol/L、2×10-6mol/L、2×10-7mol/L、2×l0-8mol/L的赤霉素溶液、醋酸缓冲液(用以稳定酶的活性)、I2-KI溶液、刀片、青霉素小瓶、分光光度计。 (2)实验步骤 ①.选取大小及发育状况一致、健康的大麦种子50粒,用刀片将每粒种子横切成两半,使其切成无胚的半粒和有胚的半粒(如下图),分别置于新配制的次氯酸钠溶液中浸泡15min,取出用无菌水冲洗数次,备用。 |
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②.取小瓶6只分组编号,按下表加入各种溶液和材料,于25℃下培养24h。 |
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③.淀粉酶活性分析:从每个小瓶中吸取培养液0.1mL,分别置于事先盛有1.9mL淀粉溶液的青霉素小瓶中,摇匀,在30℃温箱保温10min,然后加I2-KI溶液2mL,蒸馏水5mL,充分摇匀,在分光光度计下测定吸光度。 (3)上述试验中,将材料置于次氯酸钠溶液中浸泡15min,然后取出用无菌水冲洗数次的目的是________。如果1号小瓶为空白对照组,则实验材料加_______,3~6号小瓶实验材料加__________。用分光光度计测定各组溶液的吸光度,比较吸光度的差异,实际上是测_______来衡量α-淀粉酶的活性。 |