科学家将动物体内的能够合成胰岛素的基因与大肠杆菌的DNA分子***，并且在大肠杆菌中表达成功。如图，请据图回答问题：(1)此图表示的是采取_______合成基因

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科学家将动物体内的能够合成胰岛素的基因与大肠杆菌的DNA分子***，并且在大肠杆菌中表达成功。如图，请据图回答问题：

(1)此图表示的是采取_______合成基因的方法获取______基因的过程。
(2)图中①DNA是以______为模板，_______形成单链DNA，在酶的作用下合成双链DNA，从而获得了所需要的_______基因。
(3)图中②代表的是_______，在它的作用下将质粒(______DNA)切出_______末端。
(4)图中③代表________DNA含有___________。
(5)图中④表示将________；⑤表示DNA随大肠杆菌的繁殖而进行__________。
(6)如果***DNA在大肠杆菌中没有成功表达，分子水平的检测包括哪三个步骤______、______和_____。

答案

(1)人工   原胰岛素目的
(2)原胰岛素mRNA    逆转录原胰岛素目的
(3)特定的限制性核酸内切酶    环状   黏性
(4)***   原胰岛素基因
(5)目的基因导入受体细胞扩增
(6)检测转基因生物染色体的DNA上是否插入了目的基因     检测目的基因是否转录出了mRNA      检测目的基因是否翻译成蛋白质

举一反三

下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点。下图是转基因抗病香蕉的培育过程，含目的基因的DNA和质粒上的箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题：

(1)用图中的质粒和目的基因构建***质粒，不能使用SmaⅠ酶切割，原因是__________。
(2)构建含目的基因的***质粒A时，选用_________限制酶对_________进行切割，可以防止_________和____________的外源DNA片段自身环化。
(3)①~⑤中存在碱基互补配对的是_________。
(4)香蕉组织细胞具有___________，因此，可以利用组织培养技术将导入目的(抗病)基因的香蕉组织细胞培育成植株。图中④、⑤依次表示组织培养过程中香蕉组织细胞的____________、___________。
(5)培养皿中的培养基除添加营养物质外，还需要添加___________、____________等植物激素，其目的是诱导外植体完成④、⑤生理过程，培养成完整的植物体。
(6)如何检测图示过程最终是否取得成功？____________。

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一位科学家正在使用氨苄青霉素敏感型菌株进行研究，该菌株不能利用乳糖，这是因为它的乳糖操纵基因异常。该科学家有两种质粒，一种含有正常的乳糖操纵基因，另一种含有氨苄青霉素抗性基因。她运用限制酶和DNA连接酶，获得了一些含有这两个基因的***质粒。然后在一个仅以葡萄糖为唯一能源的培养基中培养该细菌，并向其中加入高浓度的***质粒，使细菌增殖。再将实验组细菌(含***质粒)和对照组细菌(不含***质粒)放入下图所示环境中让其生长。请回答下列问题：

(1)在基因工程的基本操作程序中，________是基因工程的核心。限制酶是基因工程中常用的工具，若要提取限制酶，可选择的生物是________(举出一例)。本实验中使用限制酶的作用是________。
(2)在以葡萄糖为唯一能源的培养基中加入高浓度的质粒，为了促进细菌更好地吸收***质粒，还应用_____处理细菌，使细菌处于___________。该培养基以葡萄糖为能源是因为_________。
(3)若没有新的突变发生，细菌最有可能在哪些培养基上生长出菌落_________。
A．只有1、2和4号 B．只有3、5和6号 C．只有1、2、3和4号 D．只有4、5和6号
(4)如果在准备制作***质粒时未使用DNA连接酶，则细菌最可能在_____号和____号平板上长出菌落。
(5)若该科学家用该培养基进行另一项实验如下表，在该培养基中用乳糖作为唯一能源，则细菌能在哪些培养基中长出菌落______。
A．只有10号 B．只有8号 C．7号和8号 D．8号和10号

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大肠杆菌与人类的生产生活密切相关。据图表回答下列有关问题：

(1)科研人员用放射线处理某大肠杆菌获得两个突变株A和B，然后对A和B进行实验，结果如上表。突变株A不能在一般培养基上生长的直接原因是____________。将突变株A和B混合在一起接种于一般培养基中，却能正常生长的原因最可能是_____________。
(2)上图是利用lacZ基因的插入失活筛选***质粒示意图。大肠杆菌pUC118质粒的某限制酶唯一酶切序列位于该质粒的lacZ基因中。若lacZ基因完整，便可表达出β-半乳糖甘酶，并能将培养基中含有的IPTG和x-gal水解成蓝色，形成蓝色菌落；若lacZ基因中插入了外源基因，带有pUC118质粒的大肠杆菌便不能表达β-半乳糖苷酶，将形成白色菌落；pUC118还携带了氨苄青霉索抗性基因。据此可知，作为受体的大肠杆菌应______，以便筛选已导入***质粒的受体大肠杆菌。图中获取人体基因时所用到的酶是_______试管I中必须加入的酶是___________，将利用氯化钙溶液处理(增加其细胞壁的通透性)过的受体大肠杆菌置于试管Ⅱ中，并加入在试管I中制备好的人体基因。
(3)图中的选择培养基中除含有大肠杆菌必需的葡萄糖、氮源、无机盐、水、生长因子等营养物质外，还应加入__________、_________等物质，用以筛选导入了***质粒的受体大肠杆菌。
(4)将上述处理后的大肠杆菌置于图中选择培养基上培养，以检测受体大肠杆菌是否导入***质粒，请预测菌落的颜色，并分析结果：
①．_________________________________；
②．_________________________________。

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下图表示我国自主研发的转基因抗虫水稻“华恢1号”主要培育流程，据图回答：

(1)①过程需要的工具酶是__________，④过程应用的生物技术主要是_________。
(2)***虫基因(crylA)是人们根据几种Bt毒蛋白的分子结构没计并人工合成的，这属于_________工程技术。
(3)若限制酶Ⅱ切割DNA分子后形成的末端为，则该酶识别的核苷酸序列是__________。
(4)组建理想的载体需要对天然的质粒进行改造。上图是天然土壤农杆菌Ti质粒结构示意图(部分基因及部分限制性核酸内切酶作用位点)，据图分析：
①．人工改造时，要使抗虫基因表达，还应插入___________。
②．人工改造时用限制酶Ⅱ处理，其目的是：第一，去除质粒上的__________(基因)，保证T-DNA进入水稻细胞后不会引起细胞的无限分裂和生长；第二，使质粒带有单一限制酶作用位点，有利于__________；第三，使质粒大小合适，可以提高转化效率等。
③．若用限制酶1分别切割改造过的理想质粒和带有抗虫基因的DNA分子，并构成***Ti质粒，分别以含四环素和卡那霉素的培养基培养已成功导入抗虫基因的水稻胚细胞，观察到的细胞生长的现象是_______。
(5)检测“华恢1号”抗虫性状的方法是____________。

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转基因抗病香蕉的培育过程如图所示。质粒上有PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等四种限制酶切割位点。请回答：

(1)构建含抗病基因的表达载体A时，应选用限制酶________，对_________进行切割。
(2)培养板中的卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长，欲利用该培养筛选已导入抗病基因的香蕉细胞，应使基因表达载体A中含有__________，作为标记基因。
(3)香蕉组织细胞具有__________，因此，可以利用组织培养技术将导入抗病基因的香蕉组织细胞培育成植株。图中①、②依次表示组织培养过程中香蕉组织细胞的__________。

题型：0103 期末题难度：| 查看答案