如何对土壤中细菌、放线菌及霉菌数量进行测定,要求设计实验方案!

题目

如何对土壤中细菌、放线菌及霉菌数量进行测定,要求设计实验方案!

答案

【实验内容及步骤】
一、分离
1.x05制备土壤悬液及系列稀释液
称取土壤1g,放入99mL无菌水的三角瓶中,振荡10min,即为稀释10－2的土壤悬液.另取装有无菌试管5支,用记号笔编上10－3、10－4、10－5、10－6 、10－7 .在每只试管中用无菌吸管加入4.5ml无菌水.取已稀释成10－2的土壤液,振荡后静止0.5min,用无菌吸管吸取0.5mL土壤悬液加入10－3的无菌水的试管中,并在试管内轻轻吹吸数次,使之充分混匀,即成10－3土壤稀释液.同法依次连续稀释至10-4、10-5、10-6、10-7土壤悬液.
2.x05倒平板
将已经配制好的牛肉膏蛋白胨培养基、高氏一号培养基、土豆培养基在电热炉上熔化.在无菌工作台的酒精灯旁,将培养基倒入培养皿中,加盖后轻轻摇动使其在培养基上均匀铺开,平置于桌面上,待其凝固后即为平板,注意保证无菌操作.
3.x05涂布法分离各类微生物
将0.2ml菌悬液滴在平板表面中央位置,右手拿无菌涂布器平放在平板表面,将菌悬液先沿一条子线轻轻的来回推动,是之均匀分布,然后改变方向沿另一直线来回推动,平板边缘可改变方向用涂布器再涂布几次.
4.x05培养（incubation）
28~30C,24~48hr
5.x05观察记录结果、记数（counting plates）：细菌数量=数出的菌落数/稀释度.例如,10-5稀释度时菌落数为125个,则细菌数量=125/10-5=1.25*107个/ml.
这个是大学的实验,用的方法是稀释涂平板计数.