transwell细胞迁移问题

题目

transwell细胞迁移问题
本人做transwell细胞迁移,一直做不出来,只要用棉棒一擦,不管上室和下室,细胞全部都没有了,就是用阳性含10%血清培养液放于下室,细胞也没迁移,怀疑细胞密度是不是会有影响哈?
还有既然滤膜孔径大到细胞都能迁移,那为什么加在下室的细胞因子不会通过滤膜的孔径分子运动扩散到上室,这样,研究下室趋化因子对细胞的迁移作用就没有意义,难道细胞要达到覆盖全部孔径的密度阻止下室趋化因子往上扩散,才能达到迁移的效果,
有人提出，买的transwell板几年了，是不是因为时间过长，transwell失效造成的？细胞密度貌似没这么重要，感觉是这样的！

答案

看来你做的次数已经很多了.一般而言,细胞密度会对细胞迁移率造成影响的,但是具体的影响不甚清楚.
细胞密度达到什么程度才能起到效果目前还没有定论,只能是具体实验具体摸索了.就你的实验而言,确实密度要覆盖住孔径才能起到良好的迁移效果.你不妨再试试.