盐害是导致全球水稻减产的重要原因之一，中国水稻研究所等单位的专家通过农杆菌法将CMO基因、BADH基因、mtld基因、gutD基因和SAMDC基因五个耐盐基因导

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盐害是导致全球水稻减产的重要原因之一，中国水稻研究所等单位的专家通过农杆菌法将CMO基因、BADH基因、mtld基因、gutD基因和SAMDC基因五个耐盐基因导入水稻，获得了一批耐盐转基因植株。请分析回答下列问题：

(1)水稻耐盐性状由_____个基因控制。
(2)获得耐盐基因后，构建***DNA分子所用的限制性内切酶作用于图中的____(填“a”或“b”)处。耐盐基因的载体是____。
(3)由导入耐盐基因的水稻细胞培养成植株需要利用________技术。
(4)从个体水平上检测耐盐转基因水稻是否成功可采用什么方法？_____________。

答案

(1)多
(2)a 农杆菌的质粒
(3)植物组织培养
(4)用一定浓度盐水浇灌水稻(将水稻移栽到盐碱地中)

举一反三

科学家通过探究DNA载体途径的RNA干扰技术抑制端粒酶的活性，从而抑制肿瘤细胞生长增殖以寻找一种抑制肿瘤细胞的新途径。
方法思路：
①构建干扰质粒____[插入针对人体端粒酶逆转录酶亚基(hTERT)的mRNA的干扰序列]和对照质粒PSG—CTR(插入不针对人体任何mRNA序列的对照组序列)。
②将空质粒PSG(不含目的基因)、干扰质粒PSG—AS和对照质粒分别感染肝癌细胞。
③一段时间后观察检测细胞的____。计算细胞凋亡率，绘制肝癌细胞生长曲线。结果如下图：

请回答：
(1)完成实验步骤中的空格：①．___________；②．___________。
(2)在构建质粒时，要将质粒导入大肠杆菌细胞并用_______培养基进行筛选鉴定，然后再提取。因此，在构建的表达载体质粒上必须含有__________。
(3)端粒酶可以通过以自身的_______为模板，_______为原料来合成端粒DNA。
(4)分析实验结果，得出实验结论：__________________________。

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请回答基因工程方面的有关问题：
(1)利用PCR技术扩增目的基因，其原理与细胞内DNA复制类似(如下图所示)。图中引物为单链DNA片段，它是子链合成延伸的基础。

①．从理论上推测，第四轮循环产物中含有引物A的DNA片段所占的比例为__________。
②．在第_______轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段。
(2)设计引物是PCR技术关键步骤之一。某同学设计的两组引物(只标注了部分碱基序列)都不合理(如下图)，请分别说明理由。

①．第1组：_________________________；
②．第2组：_________________________。
(3)PCR反应体系中含有热稳定DNA聚合酶，下面的表达式不能正确反映DNA聚合酶的功能，这是因为_______________。

(4)用限制酶EcoRV、MboI单独或联合切割同一种质粒，得到的DNA片段长度如下图(1kb即1000个碱基对)，请在指定位置画出质粒上EcoRV、MboI的切割位点。

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镰刀形细胞贫血症是一种单基因遗传病，是由正常的血红蛋白基因(HbA)突变为镰刀形细胞贫血症基因(HbS)引起的。在非洲地区黑人中有4％的人是该病患者，会在成年之前死亡，有32％的人是携带者，不发病但血液中有部分红细胞是镰刀形。下图是该地区的一个镰刀形细胞贫血症家族的系谱图。回答以下相关问题：

(1)非洲地区黑人中HbS基因的基因频率是______。科学家经调查发现，该地区流行性疟疾的发病率很高，而镰刀形红细胞能防止疟原虫寄生，那么该地区基因型________。为的个体存活率最高。该地区黑人迁移到不流行疟疾的美洲地区后，HbS基因的基因频率将逐渐______________。
(2)据系谱图可知，HbS基因位于______染色体上。Ⅱ₆的基因型是_______，已知Ⅱ₇也来自非洲同地区，那么Ⅱ₆和Ⅱ₇再生一个孩子，患镰刀形细胞贫血症的概率是_______。
(3)Ⅱ₆和Ⅱ₇想再生一个孩子，若孩子已出生，则可以在光学显微镜下观察其________形态，从而诊断其是否患病。若孩子尚未出生，则可以从羊水中收集少量胎儿的细胞，提取出DNA，用____________为原料在试管中复制出大量DNA，然后进行基因诊断。
(4)如下图所示，该基因突变是由于_________碱基对变成了________碱基对，这种变化会导致血红蛋白中_________个氨基酸的变化。

HbA基因突变为HbS基因后，恰好丢失了一个MstⅡ限制酶切割位点。用MstⅡ限制酶切割胎儿DNA，然后用凝胶电泳分离酶切片段，片段越大，在凝胶上离加样孔越近。加热使酶切片段解旋后，用荧光标记的CTGACTCCT序列与其杂交，荧光出现的位置可能有下图所示的三种结果。若出现__________结果，则说明胎儿患病；若出现_________结果，则说明胎儿是携带者。

题型：0110 模拟题难度：| 查看答案

ch1L基因是蓝藻拟核DNA上与叶绿素合成有关的基因。为研究该基因对叶绿素合成的控制，需要构建该种生物缺失ch1L基因的变异株细胞。构建过程如下：
第①步：用PCR技术从蓝藻环状DNA中扩增出ch1L基因片段。
第②步：将ch1L基因与质粒构建形成***质粒1。
第③步：将***质粒1中ch1L基因中部0.8kb片段删除，用一段红霉素抗性基因取代之，得到***质粒2。
第④步：将***质粒2导入蓝藻细胞，由于改造后的基因与ch1L基因仍有很长的序列相同，所以能准确地与其发生同源***，产生出缺失ch1L基因的突变株。

请根据上述资料，回答下列问题：
(1)第①步用PCR技术扩增DNA片段时用到的耐高温的酶通常是指什么酶？________。PCR扩增DNA时必须加入引物，其作用是_____________。
(2)利用PCR技术扩增DNA一般要经过三十多次循环，每次循环都要经过三个步骤，其中“复性”这一步骤发生的变化是________________。
(3)构建***质粒1、2时，为保证成功率，往往使用_________酶对基因和质粒进行切割，以切出相同的黏性末端，便于连接。此酶的作用是将DNA分子的___________键打开。
(4)质粒是基因工程中最常用的运载体，其化学本质是________，此外还可用噬菌体、动植物病毒作用为运载体。
(5)导入***质粒2以后，往往还需要进行检测和筛选，可用________制成探针，检测是否导入了***基因，在培养基中加入_______________可将变异株细胞筛选出来。

题型：0110 模拟题难度：| 查看答案

下列获取目的基因的方法中需要模板链的是
①从细胞中获取目的基因 ②利用PCR技术扩增目的基因 ③反转录法 ④通过DNA合成仪利用化学方法人工合成[ ]
A．①②③④
B．①②③
C．②③④
D．②③

题型：0127 模拟题难度：| 查看答案