高效液相色谱法中样品稀释为什么选用流动相

题目

高效液相色谱法中样品稀释为什么选用流动相

答案

用流动相稀释样品主要是为了提高分离度,增加理论塔板数,使峰形尖锐,对称.具体理由如下：
色谱法的实质是样品在流动相与固定相之间反复分配的过程,这个过程在实际中会受到很多因素的影响从而造成分离度下降,理论塔板数降低,使得分离不理想.
根据液相色谱Van Deemter方程H = A + Cμ（A为涡流扩散系数,C为传质阻抗系数,μ为流动相流速）.
涡流扩散主要由色谱柱本身造成.
传质阻抗是阻碍组分分子在固定相和流动相之间达到平衡需要进行分子的吸附、脱附、溶解、扩散等过程的因素.在理想状态中,色谱柱的传质阻抗为零,则组分分子流动相和固定相之间会迅速达到平衡,在实际体系中传质阻抗不为零.用流动相溶解稀释样品,是为了减少传质阻抗,提高分离塔板数,使得峰尖锐,对称.